PLÁNOVANÉ POUŽITÍ
StrongStep^®PROM test je vizuálně interpretovaný imunochromatografický test určený pro kvalitativní detekci fetálního fibronektinu v cervikovaginálním sekretu.Přítomnost fetálního fibronektinu v cervikovaginálním sekretu mezi 22. týdnem, 0. dnem a 34. týdnem, 6. dnem gestace jespojené se zvýšeným rizikem předčasného porodu.

ÚVOD
Předčasný porod, definovaný American College of Obstetricians and Gynecologists jako porod před 37. týdnem gestace, je zodpovědný za většinu nechromozomální perinatální morbidity a mortality.Mezi příznaky hrozícího předčasného porodu patří děložní kontrakce, změna vaginálního výtoku, vaginální krvácení, bolesti zad, břišní diskomfort, tlak v pánvi a křeče.Diagnostické modality pro identifikaci hrozícího předčasného porodu zahrnují monitorování děložní aktivity a provedení digitálního cervikálního vyšetření, které umožňuje odhadnout cervikální rozměry.Ukázalo se, že tyto metody jsou omezené, protože minimální dilatace děložního čípku (< 3 centimetry) a děložní aktivita se vyskytují normálně a nejsou nutně diagnostické pro hrozící předčasný porod.I když bylo hodnoceno několik sérových biochemických markerů, žádný nebyl široce akceptován pro praktické klinické použití.

Fetální fibronektin (fFN), isoforma fibronektinu, je komplexní adhezivní glykoprotein s molekulovou hmotností přibližně 500 000 daltonů.Matsuura a spolupracovníci popsali monoklonální protilátku nazvanou FDC-6, která specificky rozpoznává III-CS, oblast definující fetální izoformu fibronektinu.Imunohistochemické studie placent ukázaly, že fFN jeomezena na extracelulární matrici oblasti definující spojenímateřských a fetálních jednotek v děloze.

Fetální fibronektin lze detekovat v cervikovaginálním sekretu žen během těhotenství pomocí imunotestu na bázi monoklonálních protilátek.Fetální fibronektin je zvýšen v cervikovaginálním sekretu během časného těhotenství, ale je snížen od 22. do 35. týdne u normálních těhotenství.Význam jeho přítomnosti ve vagíně během prvních týdnů těhotenství není znám.Může však jednoduše odrážet normální růst populace extravilózních trofoblastů a placenty.Uvádí se, že detekce fFN v cervikovaginálním sekretu mezi 22. týdnem, 0. dnem a 34. týdnem, 6. dnem gestace je spojena s předčasným porodem u symptomatických a mezi 22. týdnem, 0. dnem a 30. týdnem, 6. dnem u asymptomatických těhotných žen.

ZÁSADA
StrongStep^®fFN Test využívá barevnou imunochromatografii, technologii kapilárního toku.Postup testu vyžaduje solubilizaci fFN z vaginálního výtěru smícháním výtěru ve vzorkovém pufru.Poté se smíšený vzorkový pufr přidá do jamky pro vzorek testovací kazety a směs migruje po povrchu membrány.Pokud je ve vzorku přítomen fFN, vytvoří komplex s primární anti-fFN protilátkou konjugovanou s barevnými částicemi.Komplex pak bude vázán druhou anti-fFN protilátkou potaženou na nitrocelulózové membráně.Objevení se viditelné testovací linie spolu s kontrolní linkou bude znamenat pozitivní výsledek.

KOMPONENTY SADA

MATERIÁLY POTŘEBNÉ, ALE NEDODÁVANÉ

OPATŘENÍ
■ Pouze pro profesionální diagnostické použití in vitro.
■ Nepoužívejte po uplynutí doby použitelnosti vyznačené na obalu.Test nepoužívejte, pokud je poškozen fóliový obal.Testy nepoužívejte znovu.
■ Tato sada obsahuje produkty živočišného původu.Ověřená znalost původu a/nebo sanitárního stavu zvířat zcela nezaručuje nepřítomnost přenosných patogenních agens.Proto se doporučuje, aby se s těmito produkty zacházelo jako s potenciálně infekčními a zacházelo se s nimi v souladu s obvyklými bezpečnostními opatřeními (nepožívat ani nevdechovat).
■ Zabraňte křížové kontaminaci vzorků použitím nové sběrné nádoby na každý získaný vzorek.
■ Před provedením jakýchkoli testů si pozorně přečtěte celý postup.
■ Nejezte, nepijte ani nekuřte v prostoru, kde se manipuluje se vzorky a soupravami.Se všemi vzorky zacházejte, jako by obsahovaly infekční agens.Během celého postupu dodržujte zavedená opatření proti mikrobiologickým rizikům a dodržujte standardní postupy pro správnou likvidaci vzorků.Při testování vzorků používejte ochranný oděv, jako jsou laboratorní pláště, jednorázové rukavice a ochranu očí.
■ Nezaměňujte ani nemíchejte reagencie z různých šarží.Nemíchejte uzávěry lahviček s roztokem.
■ Vlhkost a teplota mohou nepříznivě ovlivnit výsledky.
■ Po dokončení testu tampony opatrně zlikvidujte po jejich autoklávování při teplotě 121 °C po dobu alespoň 20 minut.Alternativně mohou být ošetřeny 0,5% chlornanem sodným (nebo domácím bělidlem) po dobu jedné hodiny před likvidací.Použité testovací materiály by měly být zlikvidovány v souladu s místními, státními a/nebo federálními předpisy.
■ Nepoužívejte cytologické kartáčky u těhotných pacientek.

SKLADOVÁNÍ A STABILITA
■ Souprava by měla být skladována při teplotě 2-30°C do data exspirace vytištěného na zataveném sáčku.
■ Test musí zůstat až do použití v uzavřeném sáčku.
■ Chraňte před mrazem.
■ Je třeba dbát na ochranu součástí této sady před kontaminací.Nepoužívejte, pokud existují známky mikrobiální kontaminace nebo precipitace.Biologická kontaminace dávkovacích zařízení, nádob nebo činidel může vést k falešným výsledkům.

ODBĚR A SKLADOVÁNÍ VZORKŮ
■ Používejte pouze sterilní tampóny se špičkou Dacron nebo Rayon s plastovými násadami.Doporučuje se používat tampony dodané výrobcem soupravy (tampony nejsou součástí této soupravy, pro informace o objednání kontaktujte výrobce nebo místního distributora, katalogové číslo je 207000).Výtěry od jiných dodavatelů nebyly validovány.Nedoporučujeme používat tampóny s bavlněnými hroty nebo dřevěnými násadami.
■ Cervikovaginální sekret se získává ze zadního fornixu pochvy.Proces sběru má být šetrný.Intenzivní nebo násilný odběr, běžný pro mikrobiologické kultury, není vyžadován.Během vyšetření spekulem, před jakýmkoli vyšetřením nebo manipulací s děložním čípkem nebo vaginálním traktem, lehce otáčejte hrotem aplikátoru přes zadní fornix pochvy po dobu přibližně 10 sekund, aby se absorboval cervikovaginální sekret.Následné pokusy o nasycení hrotu aplikátoru mohou test zneplatnit.Vyjměte aplikátor a proveďte test podle níže uvedených pokynů.
■ Pokud lze test provést okamžitě, vložte tampon do extrakční zkumavky.Pokud není možné okamžité testování, vzorky pacientů by měly být umístěny do suché transportní zkumavky pro skladování nebo přepravu.Výtěry mohou být skladovány po dobu 24 hodin při pokojové teplotě (15-30°C) nebo 1 týden při 4°C nebo ne déle než 6 měsíců při -20°C.Všechny vzorky by měly před testováním dosáhnout pokojové teploty 15-30°C.

POSTUP
Před použitím vytemperujte testy, vzorky, pufr a/nebo kontroly na pokojovou teplotu (15-30°C).
■ Umístěte čistou extrakční trubici na určené místo na pracovní stanici.Přidejte 1 ml extrakčního pufru do extrakční zkumavky.
■ Vložte tampon se vzorkem do zkumavky.Roztok intenzivně promíchejte tak, že tampónem silně otáčejte proti stěně zkumavky alespoň desetkrát (při ponoření).Nejlepších výsledků se dosáhne, když se vzorek v roztoku intenzivně promíchá.
■ Při vyjímání tamponu vytlačte z tamponu co nejvíce tekutiny tak, že stisknete stranu flexibilní extrakční hadičky.Aby došlo k adekvátní kapilární migraci, musí ve zkumavce zůstat alespoň 1/2 roztoku pufru pro vzorky.Nasaďte uzávěr na extrahovanou zkumavku.
Vyhoďte tampon do vhodné nádoby na biologický odpad.
■ Extrahované vzorky mohou uchovat při pokojové teplotě po dobu 60 minut, aniž by to ovlivnilo výsledek testu.
■ Vyjměte test z jeho uzavřeného obalu a položte jej na čistý, rovný povrch.Označte zařízení identifikací pacienta nebo kontroly.Pro dosažení nejlepšího výsledku by měl být test proveden do jedné hodiny.
■ Přidejte 3 kapky (přibližně 100 µl) extrahovaného vzorku z extrakční zkumavky do jamky na vzorek na testovací kazetě.
Vyhněte se zachycení vzduchových bublin v jamce na vzorek (S) a nepouštějte žádný roztok do pozorovacího okénka.
Jakmile test začne fungovat, uvidíte, jak se barva přes membránu pohybuje.
■ Počkejte, až se objeví barevné proužky.Výsledek by měl být odečten po 5 minutách.Neinterpretujte výsledek po 5 minutách.
Použité zkumavky a testovací kazety vyhoďte do vhodné nádoby na biologicky nebezpečný odpad.
NTERPRETACE VÝSLEDKŮ